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G25快速脫鹽柱 大分子蛋白脫鹽貨號:B2795規(guī)格:2ml本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!
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G25快速脫鹽柱 大分子蛋白脫鹽
貨號:B2795
規(guī)格:2ml
1.產(chǎn)品介紹
G25快速脫鹽柱(瓊葡糖凝膠G25 FF脫鹽柱)是將葡聚糖凝膠和瓊脂糖凝膠混合制作,再經(jīng)高度交聯(lián)制備而成。具有穩(wěn)定性好、剛性好流速快、重復(fù)性好、分辨率高,顆粒均勻,沒有非特異吸附,裝填后體積不收縮等優(yōu)點(diǎn),取代傳統(tǒng)的葡聚糖凝膠G25脫鹽柱,G25離心型脫鹽柱。
用途:用于多肽,蛋白,糖類等,快速脫鹽,緩沖液交換、純化等。
4.規(guī)格
2ml *1支、2ml *5支(填料體積為2ml/支、柱管總體積12ml)操作方法:
(采用本公司G25快速脫鹽柱可以在4-8 min左右完成一次脫鹽純化)
(1)將預(yù)裝柱頂端塞子取下,打開下端堵頭,將保存液流出或用吸管吸出,至距填料上界面2-3mm處,停止流液。
(2)平衡:用3-10倍柱體積的平衡緩沖液進(jìn)行平衡
(3)上樣:將保存液溜掉至距填料上界面2-3mm處時,開始上樣,上樣液體積控制在填料體積10-20%,最多不超過30%(即上樣量200-600ul)
(4)洗脫:加入平衡緩沖液進(jìn)行洗脫,洗脫體積應(yīng)控制在 1 倍柱體積內(nèi)(即2ml內(nèi))
(5)柱子的清洗:用平衡液對柱子進(jìn)行清洗,去除小分子
(6)保存:加入20%乙醇對柱子進(jìn)行保存,待下次繼續(xù)使用
7.使用建議
(1)上樣前,樣品需要充分溶解后離心或 0.45 um 濾膜過濾,防止堵塞層析柱。
(2)所有緩沖液需要脫氣處理,避免柱床溫度劇烈變化產(chǎn)生氣泡。
(3)樣品上樣體積控制為 10%-20%倍柱體積,最高不超過 30%倍柱體積;樣品體積越小,分辨率越高。
(4)洗脫體積應(yīng)控制在 1 倍柱體積內(nèi),若有分離不徹-底情況,調(diào)節(jié)上樣量或樣品濃度。
(5)為降低生物分子與介質(zhì)的非特異性吸附,應(yīng)降低結(jié)合液的離子濃度,如 0.025 M NaCl,若避免出現(xiàn) NaCl,建議使用揮發(fā)性緩沖液,如0.1 M 乙酸銨或0.1 M 碳酸氫胺。
(6)填料再生的辦法可以用 0.5M NaOH+2M NaCl 洗3個柱床體積,然后用水清洗到 pH為中性,再用 20%乙醇洗 3 個床體積即可。如果有脂類物質(zhì),也可以用 70%乙醇加一些非離子表面活性劑清洗 5 個柱床體積,對于變性蛋白可以用 6M 鹽酸胍溶液清洗 5 個柱床體積。
8.注意事項:
1)凝膠從冷室或冰箱中取出后最好在室溫下緩慢振搖恢復(fù)到室溫,然后再裝柱,以免產(chǎn)生氣泡影響柱效。使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響純化效果。
2)本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇,4-8℃。
G25快速脫鹽柱 大分子蛋白脫鹽
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