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相關文章G15脫鹽柱貨號:B2783規格:5ml本產品僅供科研實驗用,不做其它用途!
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G15脫鹽柱
貨號:B2783
規格:5ml
1.產品介紹
脫鹽柱(瓊葡糖凝膠G5 FF)是將葡聚糖凝膠和瓊脂糖凝膠混合制作,再經高度交聯制備而成。具有穩定性好、剛性好流速快、重復性好、分辨率高,顆粒均勻,沒有非特異吸附,裝填后體積不收縮等優點,取代傳統的葡聚糖凝膠。
2.用途
用于多肽,蛋白,糖類分離除鹽,緩沖液交換、純化等。
3.規格
1ml(預裝柱)、ml(預裝柱)、5ml(預裝柱)、10ml(預裝柱) 操作步驟:
(1)將預裝柱頂端塞子取下,打開下端堵頭,將保存液流出至距填料上界面2-3mm處,停止流液。
(2)加入5-10倍柱體積的蒸餾水或平衡緩沖液對填料進行沖洗。
(3)平衡:用5-10倍柱體積的平衡緩沖液進行平衡
(4)上樣:將保存液溜掉至距填料上界面2-3mm處時,開始上樣,上樣體積控制在填料體積10-20%,最多不超過30%
(5)洗脫:加入平衡緩沖液進行洗脫,洗脫體積應控制在 1 倍柱體積內
(6)柱子的清洗:用平衡液對柱子進行清洗,去除小分子
(7)保存:加入20%乙醇對柱子進行保存
6.使用建議
(1)上樣前,樣品需要充分溶解后離心或 0.45 um 濾膜過濾,防止堵塞層析柱。
(2)所有緩沖液需要脫氣處理,避免柱床溫度劇烈變化產生氣泡。
(3)樣品上樣體積控制為 10%-20%倍柱體積,最高不超過 30%倍柱體積;樣品體積越小,分辨率越高。
(4)洗脫體積應控制在 1 倍柱體積內,若有分離不徹-底情況,調節上樣量或樣品濃度。
(5)為降低生物分子與介質的非特異性吸附,應降低結合液的離子濃度,如 0.025 M NaCl,若避免出現 NaCl,建議使用揮發性緩沖液,如0.1 M 乙酸銨或0.1 M 碳酸氫胺。
(6)填料再生的辦法可以用 0.5M NaOH+2M NaCl 洗3個柱床體積,然后用水清洗到 pH為中性,再用 20%乙醇洗 3 個床體積即可。如果有脂類物質,也可以用 70%乙醇加一些非離子表面活性劑清洗 5 個柱床體積,對于變性蛋白可以用 6M 鹽酸胍溶液清洗 5 個柱床體積。
7.注意事項:
(1)凝膠從冷室或冰箱中取出后最好在室溫下緩慢振搖恢復到室溫,然后再裝柱,以免產生氣泡影響柱效。使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內產生氣泡,影響純化效果。
G15脫鹽柱