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伴刀豆球蛋白A瓊脂糖凝膠

伴刀豆球蛋白A瓊脂糖凝膠
英文名稱:Con A Berpharose
貨號:B2781
規格:5ml
本產品僅供科研實驗用,不做其它用途!

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-10-28
  • 訪  問  量:502
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詳細介紹

伴刀豆球蛋白A瓊脂糖凝膠

英文名稱:Con A Berpharose

貨號:B2781

規格:5ml

1.產品介紹

   伴刀豆球蛋白A-瓊脂糖凝膠是一種將伴刀豆球蛋白A(Con A)與鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質。Con A是從巨豆中分離出來的一種植物血凝素,能與含有ɑ-D-吡喃甘露糖基、ɑ-D-吡喃葡萄糖基以及與其空間位置相關的分子基團的結合。Con A與糖類分子結合主要在C-3、C-4及C-6的羥基部分,Con A與D-吡喃甘露糖的結合比與D-吡喃葡萄糖要強些,主要用于分離和純化一些糖蛋白、膜蛋白、糖脂、多糖、帶甘露糖苷或葡糖苷殘基的膜囊泡、lgM、激素脂蛋白等,例如人血清中胰蛋-白酶抑制劑、堿性磷酸酯酶、小牛脾磷酸二酯酶、不同變種的甲胎球蛋白和某些激素如絨毛膜促性-腺激素(HCG)、促黃體激素(LH)等物質都可以用它純化。


2.規格

1ml(預裝柱)、5ml(預裝柱)、10ml(預裝柱)、20ml、100ml、500ml、1L 純化流程

應用舉例:


平衡緩沖液:20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、pH7.4

結合緩沖液:20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、pH7.4

(該填料如需在 pH 小于5.0下操作,必須Mn2+和Ca2+的存在時才具有吸附活性)

洗脫緩沖液: 20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、0.1M-0.2Mɑ-D-甲

基甘露糖苷(或ɑ-D-甲基葡萄糖苷)、pH7.4

(注:洗脫液中ɑ-D-甲基甘露糖苷或ɑ-D-甲基葡萄糖苷濃度可根據物質吸附能力進行線性或梯度洗脫。甘露糖和葡萄糖亦可以做洗脫物質,但洗脫能力較弱。結合能力較強的物質可采用降低洗脫液pH洗脫,但不要低于pH4.0。可采用硼酸鹽作為洗脫液,如0.1M硼酸鹽,pH6.5。)

平衡:用3-5個柱體積的平衡緩沖溶液進行平衡,觀察檢測器的變化,直到電導率、  

                       pH值等參數不變。

上樣:樣品的預處理,樣品需至少用0.45μm濾膜過濾,在上樣,以免堵塞層析柱。

                      上樣量根據樣品的性質和層析介質的量進行選擇,也可通過線性實驗找到最佳

                       上樣量。

淋洗:用5-10個柱體積的平衡緩沖液進行淋洗,觀察檢測器的變化,直到電導率、pH

                      值等參數基本不變。

(4)洗脫:使用 5-10 倍柱體積的洗脫液,收集洗脫峰(部分洗脫方式需中和液中和)。

(5)清洗保存:依次使用 3 倍柱體積的平衡緩沖液液和 5 倍柱體積的去離子水平衡填料,然后保存在等體積的20%乙醇中,置于 4-8 ℃保存。


5.在位清洗(CIP):

填料可以重復使用無需再生,但隨著非特異性結合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和結合載量都下降,這時可按照下面方法對樹脂進行清洗。

用 3-4 倍柱體積的含有0.5M NaCl的pH8.5或pH4.5的緩沖液清洗,然后立即用5倍柱體積的結合液平衡。

去除結合力較強物質:用 2 倍柱體積的含1% Triton X-100,pH6.5的0.1M硼酸鹽緩沖液清洗,或20%乙醇或50%乙二醇溶液清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS,pH 7.4清洗。


6.注意事項:

(1)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內產生氣泡,影響純化效果。

(2)本產品保存條件為20%乙醇,4-8℃。

(3)運輸:4-25℃,常,,避光。

(4)僅供科研實驗使用。


伴刀豆球蛋白A瓊脂糖凝膠

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