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藍色瓊脂糖凝膠FF
英文名稱:Blue-Berpharose FF
貨號:B2780
1.產品介紹
藍色-瓊脂糖凝膠FF是一種將活性藍 3G鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質。該產品保留了瓊脂糖極-好的親水性及大網架結構,與生物活性大分子有很好的相容性,主要用于純化白蛋白、干擾素、需要核苷酸輔助的酶、ɑ2-巨球蛋白凝血-因子等。
2.規格
1ml(預裝柱)、5ml(預裝柱)、10ml(預裝柱)、20ml、100ml、500ml、1L 純化流程
應用舉例:人血清白蛋白(HSA)的純化
平衡緩沖液:50mM Na2HPO4、50mM 檸檬酸鈉、pH7.0
結合緩沖液:50mM Na2HPO4、50mM 檸檬酸鈉、pH7.0
洗脫緩沖液:50mM Na2HPO4、50mM 檸檬酸鈉、1-2M NaCl、pH7.0
(注:結合液和洗脫液可根據樣品性質進行適當改變,原則是低鹽上樣高鹽洗脫)
平衡:用3-5個柱體積的平衡緩沖溶液進行平衡,觀察檢測器的變化,直到電導率、 pH值等參數不變。
上樣:樣品的預處理,樣品需至少用0.45μm濾膜過濾,在上樣,以免堵塞層析柱。上樣量根據樣品的性質和層析介質的量進行選擇,也可通過線性實驗找到最佳上樣量。
淋洗:用5-10個柱體積的平衡緩沖液進行淋洗,觀察檢測器的變化,直到電導率、pH值等參數基本不變。
(4)洗脫:使用 5-10 倍柱體積的洗脫液,收集洗脫峰。
(5)清洗保存:依次使用 3 倍柱體積的平衡緩沖液液和 5 倍柱體積的去離子水平衡填料,然后保存在等體積的20%乙醇中,置于 4-8 ℃保存。
5.在位清洗(CIP):
填料可以重復使用無需再生,但隨著非特異性結合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和結合載量都下降,這時可按照下面方法對樹脂進行清洗。
(1)去除一些沉淀或變性物質:用 3-4 倍柱體積的0.1M NaOH,然后用3-4倍柱體積的70%乙醇或2M硫青酸鉀溶液清洗,然后立即用5倍柱體積的結合液平衡。
(2)去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質:用 3-4 倍柱體積的70%乙醇或30%的異丙醇或1% Triton X-100 清洗,然后立即用5倍柱體積的結合液平衡。
注意事項:
(1)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內產生氣泡,影響純化效果。
(2)本產品保存條件為20%乙醇,4-8℃。
(3)運輸:4-25℃,常,避光。
(4)僅供科研實驗使用。
藍色瓊脂糖凝膠FF