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大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)指南 |
此ELISA試劑盒的英文名稱是--- |
Rat lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit |
規(guī)格: | 48T/96T |
我們的elisa試劑盒具有如下優(yōu)點(diǎn): |
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一、高效、靈敏、特異的抗體; |
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性; |
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體; |
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型; |
五、性價比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。 |
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。自上世紀(jì)70年代初問世 以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用 于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。 |
大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)指南 |
Rat lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit |
ELISA技術(shù)原理:以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底 |
物的高效催化作用相結(jié)合起來 |
1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。 |
2. 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。 |
3. 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。 |
4. 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記 的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。 |
5. 此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。 |
6. 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量 與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定 性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重復(fù)性好。 |
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Rat lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit |
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我們采用的酶: | 辣根過氧化酶(HRP) |
1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。 |
2. 是一種糖蛋白,含糖量約18%;分子量為44kD。 |
3. 是一種復(fù)合酶,由主酶(酶蛋白)和輔基(亞鐵血紅素)結(jié)合 而成的一種卟啉蛋白質(zhì)。 |
4. 主酶為無色糖蛋白,在275nm波長處有zui高吸收峰;輔基是深 棕色的含鐵卟啉環(huán),在403nm波長處有zui高吸收峰。 |
HRP催化下列反應(yīng): |
DH2+H2O2<==HRP==>D+2H2O |
上式中DH2為供氫體,H2O2為受氫體。HRP對受氫體的專一 性很高,除H2O2外,僅作用于小分子醇的過氧化物和尿素的過 氧化物。后者為固體,作為試劑較H2O2方便。許多化合物可作 為HRP的供氫體,在ELISA中常用的供氫體底物為鄰苯二胺(orthopenylenediamine,OPD)、四甲基聯(lián)苯胺(3,3', 5,5'-tetramethylbenzidine,TMB)和ABTS[2,2'-azino- bis(3-ethyl-benzthiazolinesulfonate-6)]。 |
大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 |
Rat lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit |
測定步驟 |
1.加樣 |
| 1. 除包被外都需45度加樣 |
| 2.加樣體積要準(zhǔn)確 |
| 3.管底加樣,不能加在管壁上 |
| 4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡 |
2.溫浴 | |
| 1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。 |
| 2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。 |
| 3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。 |
| 4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。 |
3.洗滌 | |
| 1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。 |
| 2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。 |
4.讀板 | |
| 1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。 |
| 2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。 |
如果你想了解更多該ELISA試劑盒的詳細(xì)信息,咨詢。我們將竭誠為您服務(wù)。 |