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所有產品僅供科研使用,不能用于食用和醫療等
產品名稱: | 人I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒 | ||||
產品英文名稱: | Human Collagen Type Ⅰ,Col-1 ELISA kit | ||||
產品規格: | 48T/96T | ||||
產品用途: | 科研實驗 | ||||
保存條件: | 2-8℃ | ||||
有效期: | 6個月 | ||||
人I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒 | |||||
組成 | |||||
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶 | |||||
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品(96μmol/L) 0.5ml×1 瓶 | |||||
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶 | |||||
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份 | |||||
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張 | |||||
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個 | |||||
標本要求 | |||||
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能 | |||||
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融 | |||||
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 | |||||
人I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒 | |||||
操作步驟 | |||||
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 | |||||
釋。 | |||||
48μmol/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |||||
24μmol/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |||||
12μmol/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |||||
6μmol/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |||||
3μmol/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |||||
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、 | |||||
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl, | |||||
然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡 | |||||
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 | |||||
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。 | |||||
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 | |||||
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此 | |||||
重復5 次,拍干。 | |||||
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 | |||||
7. 溫育:操作同3。 | |||||
8. 洗滌:操作同5。 | |||||
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 | |||||
10 分鐘. | |||||
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 | |||||
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 | |||||
液后15 分鐘以內進行。 | |||||
人I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒 | |||||
計算 | |||||
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的 | |||||
OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD 值計算出標 | |||||
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數, | |||||
即為樣品的實際濃度。 | |||||
注意事項 | |||||
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未 | |||||
用完,板條應裝入密封袋中保存。 | |||||
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。 | |||||
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間 | |||||
控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。 | |||||
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值 | |||||
大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計 | |||||
算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。 | |||||
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 | |||||
6.底物請避光保存。 | |||||
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準. | |||||
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 | |||||
9.本試劑不同批號組分不得混用。 | |||||
保存條件及有效期 | |||||
1.試劑盒保存:;2-8℃。 | |||||
2.有效期:6 個月 | |||||
人I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒 | |||||
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