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上海信帆生物開展了麗春紅如何配置的培訓(xùn)活動

更新時間:2020-07-14      瀏覽次數(shù):1107

 上海信帆生物開展了麗春紅如何配置的培訓(xùn)活動

很多實驗室的同學(xué)需要麗春紅的染色試劑,但是對于配置方法并不是特別了解,上海信帆生物正對該染色液的配置特別開展了一次別開生面的培訓(xùn)活動,讓大家對這個都有了有一個全新的認(rèn)識和了解,下面讓我們一起走進培訓(xùn)室,來了解一下吧!

Molecular Formula: C 22 H 12 N 4 Na 4 O 13 S 4

Molecular Weight::760.6

CAS Number: 6226-79-5

λ : 520 nm (water)

麗春紅(Ponceau S)也稱猩紅,可以用于PVDF膜、硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纖維素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的檢測。麗春紅帶負(fù)電荷,可以與帶正電荷的氨基酸殘基結(jié)合,同時麗春紅也可以與蛋白的非極性區(qū)相結(jié)合,從而形成紅色的條帶。麗春紅染色的靈敏度不及考馬斯亮藍染色。

麗春紅對蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸餾水,PBS或其它適當(dāng)溶液洗去。因此,蛋白質(zhì)N端測序時將SDS-PAGE膠上的蛋白轉(zhuǎn)移到PVDF膜,用麗春紅染色后將目的條帶切下用于測序。

注意:麗春紅染色液不適用于尼龍膜上的蛋白的檢測。

使用說明

將PVDF膜、硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜浸沒在麗春紅染色液中,搖動5-10分鐘或更長時間;取出印跡膜,用蒸餾水,PBS或其它適當(dāng)溶液漂洗2-3次,可出現(xiàn)清晰條帶,記錄結(jié)果;用蒸餾水,PBS或其它適當(dāng)溶液漂洗2-3次,每次3-5分鐘,去除麗春紅,進行后續(xù)的WB檢測。

補充:麗春紅染色液也可以直接用來染PAGE膠,不過,在染色之前好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE膠,起到固定蛋白的作用。

麗春紅染色液的配制

常用的麗春紅染色液有兩種:一種用乙酸配制,另外一種用三氯yi酸(TVA)和5-磺基水楊酸(5-Sulfosalicylic acid)配制。配制方法如下:

一、用乙酸配制成分:0.1%(w)麗春紅,5%(v)乙酸,ddH 2 O。

4 ℃保存,不要凍上。也可以配成“0.2%(w)麗春紅,3%(v)乙酸,ddH 2 O”。

二、用三氯yi5-磺基水楊酸成分:2% (w)麗春紅,30%的三氯yi,30%的5-磺基水楊酸。

 上海信帆生物開展了麗春紅如何配置的培訓(xùn)活動

 


  

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