PRODUCT CLASSIFICATION
產(chǎn)品分類信帆生物供應(yīng)T3放免檢測(cè)試劑盒,提供T3放免代測(cè)服務(wù)
上海信帆生物提供多種放免檢測(cè)服務(wù),包括T3放免檢測(cè),T4放免檢測(cè),F(xiàn)T3,FT4放免檢測(cè),性激素類放免檢測(cè)等等。檢測(cè)周期快,結(jié)果準(zhǔn)確,歡迎大家咨詢!
通用名:碘[ 125I]- 三碘甲腺原氨酸放射免疫分析藥盒
漢語(yǔ)拼音:Dian[ 125I] Sandianjiaxianyuan'ansuan Fangshemianyifenxi Yaohe
英文名:Iodine[ 125I]- 3,3’, 5-Triiodothyronine Radioimmunoassay Kit
簡(jiǎn)稱:碘[ 125I] 三碘甲腺原氨酸 (T3)放免藥盒
[使用目的]
用于定量測(cè)定科研血清(或血漿)中三碘甲腺原氨酸 (T3)的濃度。
[用途]
三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4),二者均為酪氨酸的碘化物,由甲狀腺分泌。
其中 T4在外周脫碘后,約 2/5 轉(zhuǎn)化為 T3(T3),3/5 轉(zhuǎn)化為反 T3(r T3),這一過(guò)程
是在肝內(nèi)完成的。肝細(xì)胞的微粒體和胞漿膜內(nèi)存在碘化甲狀腺素脫碘酶,其中 5ˊ-
脫碘酶催化 T4分解為高能的 T3, 5-脫碘酶催化 T4分解為無(wú)活性的 rT3。在肝細(xì)胞內(nèi),
甲狀腺激素分布于細(xì)胞核、線粒體、微粒體和可溶性成分中,在這些部分中其含量水
平的高低變化依次為:可溶性成分﹥微粒體﹥線粒體﹥細(xì)胞核,且 T4﹥T3。肝臟是甲
狀腺素代謝、滅活的主要場(chǎng)所,也是甲狀腺素結(jié)合蛋白的合成部位,該結(jié)合蛋白可與
血清蛋白競(jìng)爭(zhēng)性攝取甲狀腺素,是肝臟攝取甲狀腺素的主要因素。血清中,甲狀腺素
絕大部分與蛋白質(zhì)結(jié)合,僅極少部分呈游離型,游離型甲狀腺素的多少與肝臟對(duì)甲狀
腺素的攝取量成正比。肝硬化時(shí),甲狀腺素的代謝將必然受到影響。定量測(cè)定總 T3
含量,對(duì)評(píng)價(jià)甲狀腺功能狀態(tài)具有重要意義。
[試驗(yàn)原理]
本品采用了第二抗體+聚乙二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理:含 T3的樣品和 125I 標(biāo)記
的 T3 與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及 PEG,使免疫復(fù)合物
沉淀,離心,測(cè)沉淀物放射性強(qiáng)度。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中 T3的濃度。
[試劑主要組成成分]
1、T3標(biāo)準(zhǔn)品:
一套共 6 瓶,以不含 T3的科研血清為基質(zhì),用時(shí)輕輕搖勻,2~8℃冷存。
T3標(biāo)準(zhǔn)品濃度
A
B
C
D
E
F
(單位)
0
0.5
1.0
2.0
4.0
8.0
ng/mL
0
0. 8
1.5
3.1
6.2
12.3
nmol/L
2、質(zhì)控血清:兩瓶,0.5 ml/瓶 2~8℃冷存。
3、
抗 T3血清: 一瓶,藍(lán)色溶液,2~8℃冷存。
4、125I- T3標(biāo)記物: 一瓶,< 88.23 kBq/瓶,紅色溶液,2~8℃冷存。
5、
分離劑: 一瓶,綠色溶液,充分搖勻后使用,2~8℃冷存。
[儀器]
1、
γ-計(jì)數(shù)器
2、低溫離心機(jī)
樣本收集和保存:
110 微升科研血清樣本。
采靜脈血 5ml 于塑料試管中,靜置使其凝固后,1500 轉(zhuǎn)/分離心,取其上清液,放置玻
璃瓶中。如果樣本不立即使用,可在-18℃~-25℃儲(chǔ)存 6 個(gè)月。嚴(yán)重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響。
[使用前準(zhǔn)備]
試驗(yàn)前,恢復(fù)樣本至室溫,小心搖勻血清樣本。
[實(shí)驗(yàn)方法]
1、將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作;
2、取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào),所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù);
3、取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 50µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中;
4、每管均各加入 200µl 標(biāo)記物工作液;
5、除去 T、NSB 管以外的各管均各加入 200µl 抗體工作液,充分混勻;
6、37℃溫育 1.0 小時(shí);
7、每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻;
8、室溫放置 10~15 分鐘后,離心 3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液;
9、用 γ-計(jì)數(shù)器測(cè)定各管放射性計(jì)數(shù)(CPM)。 推薦檢測(cè)時(shí)間: 1 分鐘
10、從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。
操作流程(Assay Procedure)
(單位μL)
T
NSB
標(biāo)準(zhǔn)品(Standards)
質(zhì)控品和人樣品(QC&Samples)
A(B0)
B
C
D
E
F
L
H
1
2
3
…..
標(biāo)準(zhǔn)品
A
50
50
標(biāo)準(zhǔn)品
B-F
50
50
50
50
50
質(zhì)控品和
人樣品
50
50
50
50
50
….
125I-T3
抗 T3血清
混勻,37℃水浴溫育 60 分鐘(Vortex and Incubate 60 minute at 37℃)
分離劑
500
搖勻,室溫放置 10~15 分鐘,3500RPM 離心 20 分鐘(溫度低于 25℃)
Vortex,Centrifuge for 20 minutes at3,500 RPM (Below25℃)
吸去上清液 Aspirate the Supernate of the tubes
沉淀物計(jì)數(shù) 1 分鐘 Count for 1 minute
[實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意]
1、γ-計(jì)數(shù)器本底計(jì)數(shù)應(yīng)≤100CPM/分,效率應(yīng)≥75%;
2、加入放射性標(biāo)記物時(shí),應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎,以避免造成放射性污染;
3、如果某一個(gè)樣本的測(cè)定值高于高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度,用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1:2 或 1:4
的比例稀釋樣本后重新測(cè)試,測(cè)試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
[質(zhì)量控制]
200
200每次實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)至少采用兩個(gè)濃度的質(zhì)控血清進(jìn)行質(zhì)量控制,以確保每次實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果
的可靠性。
1、質(zhì)控血清的平均值應(yīng)在允許范圍內(nèi);
2、曲線方程應(yīng)采用佳擬合方式;
3、重復(fù)樣本的測(cè)定結(jié)果相差在 15%以內(nèi)。
如不能同時(shí)滿足以上條件,則此次試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效,全部試驗(yàn)需重新進(jìn)行。
[測(cè)定結(jié)果的計(jì)算]
1、計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品(B~F)、質(zhì)控品和樣品與標(biāo)準(zhǔn)品 A 的比值(B/B0);
2、劑量-反應(yīng)曲線按“對(duì)數(shù)劑量-結(jié)合率對(duì)數(shù)”(Log(dose)-Log(B/ B0))數(shù)學(xué)模型或四參
數(shù)數(shù)學(xué)模型擬合,通過(guò)每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的 B/B0和其濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線;
3、從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣本的濃度值,B/B0應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線之內(nèi)的樣本及其濃度
[實(shí)驗(yàn)的局限性]
1、本品僅供體外診斷使用,只能用于科研血清或血漿樣本的測(cè)定而不能用于其它體液樣
本;
2、通過(guò)其它方法得到的 T3值與本品測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。
[產(chǎn)品性能指標(biāo)]
1、靈敏度:
取藥盒中校準(zhǔn)試劑 A 點(diǎn)(0 劑量)作 20 平行管,求其均值 X 及偏差 SD,從劑量—反
應(yīng)曲線上查出與 X+2SD 相對(duì)應(yīng)的劑量值,確定為本藥盒的靈敏度(小檢出值),為
0.1ng/ml。
2、精密度:
精密度是質(zhì)量控制的基本參數(shù),用批內(nèi)變異系數(shù)和批間變異系數(shù)確定。要求批內(nèi)變
異系數(shù) < 10% ,批間變異系數(shù) < 15% 。
批內(nèi)變異系數(shù):指不同濃度的三個(gè)樣品 C1、C2、C3 同時(shí)分別進(jìn)行多個(gè)復(fù)管一次測(cè)定中的
重復(fù)性,應(yīng)小于 10%。
C1
C2
C3
批內(nèi)變異系數(shù)
6.21%
5.04%
4.12%
批內(nèi)變異系數(shù)均小于 10%。
批間變異系數(shù):指不同濃度的三個(gè)樣品 C1、C2、C3 在多次測(cè)定間的重復(fù)性,應(yīng)小于 15%。
B/B0×100 = 標(biāo)準(zhǔn)品或樣品(STD or Samples)(CPM)—NSB(CPM)
A 標(biāo)準(zhǔn)(STD)(CPM)—NSB(CPM)
×100C1
C2
C3
批間變異系數(shù)
8.98%
6.14%
5.02%
批間變異系數(shù)均小于 15%。
3、測(cè)定范圍:
采用零標(biāo)準(zhǔn)品添加高濃度的 T3,確定本試劑盒的測(cè)定范圍為 0~8 ng/ml
1、
正常參考值
0.6-2.1ng/mL(1.1-3.5nmol/L)
建議各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立本實(shí)驗(yàn)室的正常值,以上數(shù)據(jù)僅供參考。
[規(guī)格] 50 人份/盒、100 人份/盒
[儲(chǔ)藏]冷凍組份-20℃,冷藏組份 2~8℃。
[有效期] 1 個(gè)月
信帆生物供應(yīng)T3放免檢測(cè)試劑盒,提供T3放免代測(cè)服務(wù)
郵箱:1170233632@qq.com
傳真:021-51870610
地址:上海市顧戴路2988號(hào)B幢7樓