提高
熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒的產(chǎn)品質(zhì)量
微量加樣器的使用規(guī)定
1.微量加樣器校正::使用微量加樣器吸10μl 10次是否為100μl。
2.加樣前吸頭潤(rùn)濕:當(dāng)吸頭排空時(shí),仍會(huì)有一些殘留的液體以薄膜的形式吸附在吸頭里面,所以,在加樣時(shí)先吸打液體數(shù)次,充分潤(rùn)濕吸頭管腔,以保證加樣的一致性。
3.加樣時(shí)吸頭應(yīng)靠試管壁:加樣時(shí)吸頭的液體順著管壁流出,防止液滴的形成由于其表面張力的作用而阻止樣本的釋放。
4.吸頭是否與加樣器上吸頭套筒密封:樣器上吸頭與套筒密封完好。
5.加樣時(shí)注意*停點(diǎn)和第二停點(diǎn):吸液是應(yīng)注意大拇指按下按鈕至*停點(diǎn),緩慢慢慢吸入液體。停留1s,然后將吸頭提離液面。用吸紙抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。放液時(shí)經(jīng)過*停點(diǎn),停1-2s后,繼續(xù)按壓到第二停點(diǎn),排出殘余液體。
6.PCR反應(yīng)原液由于有甘油在冷的狀態(tài)較黏稠,易于1次吸取數(shù)人份,慢一些。
7.邊加邊看,直觀估計(jì),防止跳管。
8.低溫冷藏批量DNA提取液、PCR反應(yīng)液A和B取出時(shí)是否充分混勻后,分裝使用,PCR反應(yīng)液A和B是否避光低溫冷藏和使用。
9.配PCR反應(yīng)液應(yīng)先加緩沖液再加PCR反應(yīng)液充分混勻,必要時(shí)倒置混勻,再離心,或用滅菌吸頭上下吸幾次。
10.PCR反應(yīng)液(包括樣品)應(yīng)充分混勻:保證PCR反應(yīng)曲線呈S形,全陰性樣品呈近似水平曲線。