瓊脂糖凝膠CL-4B現(xiàn)貨供應(yīng)-上海信帆生物

瓊脂糖凝膠CL-4B

規(guī)格：10ml/50ml/100ml/500ml

產(chǎn)品說明

瓊脂糖凝膠 CL-4B 是在瓊脂糖凝膠 4B 的基礎(chǔ)上通過交聯(lián)使微球的剛性增強(qiáng)，理化性能提高，有利用于工業(yè)

生物試劑。該介質(zhì)用于生物大分子的凝膠層析。本品呈白色球狀凝膠，無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。本產(chǎn)品具有很

高的化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、較好的機(jī)械性能、可多次重復(fù)使用等特點，非特異性吸附低，回收率高，可用有機(jī)溶

劑及 1~2mol/L 的 NaOH 在位清洗，適用于工業(yè)規(guī)模生物試劑，廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多

肽的凝膠色譜純化。

操作步驟：(僅供參考)

1、裝柱

凝膠過濾介質(zhì)的使用對裝柱的要求較高，為了保證分離效果，一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿

凝膠，或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于 60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗。

以下過程為通用介質(zhì)裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子，可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊，接好管路。

（1）讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。

（2）選擇一根一定直徑的柱子，長約 30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠（約為柱床體積的 1.15 倍），清洗掉

20%乙醇，抽干，用緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1 的比例）配成勻漿。

（3）將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無氣泡。

（4）用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉

降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

（5）打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時流速的 1.33 倍的流速流過，使柱床穩(wěn)定。用緩沖液平衡柱子，到柱床穩(wěn)定。

（6）好用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平，上好柱頭。

項目

說明

基質(zhì)

4%交聯(lián)瓊脂糖

排阻極限

6×104~2×107 (球蛋白)

形狀

球形

粒徑

45~165 μm

高流速

30 cm/h*

耐熱

pH7 水中 120℃20min

耐壓

0.025 MPa

pH 穩(wěn)定性

3~13(長時間)，2~14(短時間，在位清洗)

化學(xué)穩(wěn)定性

可耐 8mol/L 尿素、6mol/L 鹽酸胍；可耐有機(jī)溶劑，如乙醇、DMF、THF、DMS、CH3Cl、

丙酮、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、吡啶、乙腈

檢測條件

層析柱 10mm×300mm *柱床高 15cm，25℃，流動相為 0.1mol/LNaCl2、平衡:讓緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和 pH 不變。

3、上樣:

（1）樣品用緩沖液配制，要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理，再上樣。

（2）介質(zhì)對樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的，分子量大的先流出來。

（3）上樣體積約為柱體積的 1~2%，越小分離越好。

4、洗脫:用緩沖液洗脫，洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。

5、再生:一般用緩沖液洗到平衡，可再次使用。

6、在位清洗

（1）對于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用 2M Nacl 去除。

（2）對沉淀蛋白、對以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類，可用 1M NaOH 去除。

（3）對強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，用 4~10 倍柱體積的 70%乙醇或 30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑

的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。

清洗完畢后，用至少 3 倍緩沖液平衡柱子。

7、去熱源

用 0.5M 的氫氧化鈉清洗柱子 5~6 小時或用 0.1M 的氫氧化鈉 24 小時。或用以下方法步驟去除：

（1）2 倍柱體積的 70%乙醇；

（2）2 倍柱體積 50mM Tris-HCl pH7.5；

（3）1 倍柱體積 4M 尿素；

（4）3 倍柱體積的 Tris 緩沖液+0.1M NaCl；

以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。

8、 消毒:用 0.5~1M NaOH 室溫下洗 8~10 倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。

注意事項

在裝柱、使用和保存柱子的時候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入

產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在 4℃~25℃（保存溶液為 20% 乙醇），通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。

用過的柱子貯存在 4℃（20% 乙醇）。

本產(chǎn)品避免與氧化劑接觸；避免長時間暴露在空氣中。

保質(zhì)期：5 年。

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