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elisa檢測服務(wù)對標(biāo)本的要求

更新時間:2018-09-27      瀏覽次數(shù):1249
   elisa檢測服務(wù)對標(biāo)本的要求
  1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
  2.不能檢測含nan3的樣品,因nan3抑制辣根過氧化物酶的(hrp)活性。
  人蓖麻毒素(ricin)elisa檢測試劑盒操作步驟
  1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
  2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50µl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40µl,然后再加待測樣品10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
  3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
  5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。
  7.溫育:操作同3。
  8.洗滌:操作同5。
  9.顯色:每孔先加入顯色劑a50µl,再加入顯色劑b50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  10.終止:每孔加終止液50µl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(od值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
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