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產品分類人纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)試劑盒現貨供應,歡迎大家!
纖維蛋白原,是一種由肝臟合成的具有凝血功能的蛋白質。纖維蛋白是在凝血過程中,凝血酶切除血纖蛋白原中的血纖肽A和B而生成的單體蛋白質。
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作用
纖維蛋白原可以促進血小板的聚集,促進平滑肌和內皮細胞的生長、增殖和收縮,增加血液粘滯性和外周阻力,引起內皮細胞損傷,促進膠原和去氧核糖核酸合成,趨化單核/巨噬細胞向內膜下遷移,促進紅細胞粘著和血栓形成,因此,它在心血管疾病的發病中具有十分重要作用。
研究意義
研究資料表明:①纖維蛋白原水平升高患者中,多數可發生心肌梗塞或猝死,且纖維蛋白水平越高,危險性亦越大;②血漿纖維蛋白原升高是促進動脈粥樣硬化發病的一個重要因素;③纖維蛋白原升高,血液處于高凝狀態,血流速度減慢,血液粘滯性增加,易于產生血栓;④高血壓時常伴有纖維蛋白原水平升高,它是誘發和加重高血壓的一個重要原因;⑤纖維蛋白原與脂肪代謝有著密切關系;⑥此外,老年、吸煙、肥胖、應激、口服避藥和糖尿病等可以促進體內纖維蛋白原水平升高。
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檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心法:抗人纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)單抗包被于酶標板上,標本和標準品中的纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)會與單抗結合,游離的成份被洗去。加入酶標抗體,抗人纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)抗體與結合在單抗上的人纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物,若反應孔中有纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1),辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現藍色,加終止液變黃。在450nm處測OD值,纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)濃度與OD450值之間呈正比,可通過繪制標準曲線求出標本中的纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)濃度。
人纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)檢測試劑盒樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會
影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養上清:取細胞培養上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測
6. 樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。
7. 樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融。
8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品zui高值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數)。
試驗所需自備物品:
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
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