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技術文章/ Technical Articles

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  • 2016

    5-4

    在細胞中,蛋白質并不是孤單的個體。大多數蛋白通過與分子伴侶或其他蛋白形成復合物而發揮其功能。因此,在了解細胞的生物學特性時,蛋白質相互作用(PPI)研究就成了重要一環。在藥物開發的過程中,這一信息也至關重要,有助于確認藥物靶點。一提起蛋白質相互作用研究,你的腦海中可能馬上浮現出:酵母雙雜交、免疫共沉淀等技術。的確,這些都是經典方法,可有效檢測體內體外蛋白質相互作用。然而,它們不能提供動態的蛋白相互作用信息,似乎還缺乏一些說服力。基于此,共振能量轉移這種方法受到人們的青睞。這種...

  • 2016

    5-3

    痛風發作會在人體關節部位引發炎癥和劇烈疼痛,但過了一段時間后,炎癥通常會自動減弱,疼痛感也逐漸消失。這為何會發生?德國研究人員發現,原因在于一種人體免疫細胞的“自殺式攻擊”。痛風的病因是體內嘌呤物質新陳代謝紊亂,導致尿酸合成增加、排出減少,造成高尿酸血癥。血液中尿酸濃度過高時,尿酸會以微小的鈉鹽結晶(俗稱痛風石)形式析出,積累在關節、軟骨和腎臟中,引發炎癥。德國埃爾朗根大學近日發表研究公報稱,其研究人員發現,人體免疫系統的嗜中性粒細胞在抗擊痛風引發的炎癥中發揮了關鍵作用。實驗...

  • 2016

    5-2

    Dmem(A)細胞培養基(粉末型)成分序號化合物名稱含量(mg/L)序號化合物名稱含量(mg/L)1無水氯化鈣.2H2O265.0018L-絲氨酸42.002硝酸鐵.9H2O0.1019L-蘇氨酸95.003氯化鉀400.0020L-色氨酸16.004無水硫酸鎂97.6721L-酪氨酸72.005氯化鈉6400.0022L-纈氨酸94.006無水磷酸二氫鈉109.0023D-泛酸鈣4.007丁二酸75.0024酒石酸膽堿7.208丁二酸鈉100.0025葉酸4.009L-鹽酸...

  • 2016

    4-28

    Q:westernblot中脫脂奶粉封閉的是哪些蛋白?原理是什么?A:脫脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原的蛋白去封閉膜,避免標記抗體固定在膜上引起背景增高。Q:請問封閉液和抗體稀釋液用BSA和脫脂奶粉有什么區別呢?有人跟我說奶粉的封閉效果更好些,但是通常只能用于WesterBlot,如果要做elisa或者phagedisplay時候,蛋白鋪板的話,不能使用脫脂奶粉。可是也有人說可以,請問是否有這個說法呢?A:所謂封閉是用以減少或消除載體上的非特異性結合蛋白的分...

  • 2016

    4-27

    考馬斯亮蘭G250與蛋白質結合,在0-1000ug/ml范圍內,于波長595nm處的吸光度與蛋白質含量成正比,可用于蛋白質含量的測定。考馬斯亮蘭G250與蛋白質結合迅速,結合產物在室溫下10分鐘內較為穩定,是一種較好的蛋白質定量測定方法。1.實驗部分1.1儀器與試劑:LabtechUVPOWER紫外分光光度計;玻璃比色皿一套;考馬斯亮藍G250;牛血清蛋白;超純水。1.2試液的制備:牛血清蛋白標準溶液(1000ug/ml)的制備稱取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中,加...

  • 2016

    4-26

    (一)、儀器設備1)18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或醫用微波爐;2)水浴鍋(二)、試劑1)pbs緩沖液(pH7.2~7.4):NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L。2)0.01mol/L檸檬酸鹽緩沖液(CB,pH6.0,1000ml):檸檬酸三鈉3g,檸檬酸0.4g。3)0.5mol/LEDTA緩沖液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10mmol/LNaOH調至pH...

  • 2016

    4-25

    三月二十日,來自中科院廣州生物醫藥與健康研究院、武漢菲沙基因信息有限公司(Frasergen)和加拿大西蒙佛雷澤大學的研究人員,在學術期刊《JournalofBioLogicalChemistry》發表學術論文,該研究檢測了iPSC生成及隨后基因校正過程中的基因組不穩定性,指出重編程和基因打靶可能會產生大量但卻不同的基因組變化,因此,在iPSC誘導時及基因打靶之后,必須進行嚴格的基因組監控和選擇。本文通訊作者是中科院生物醫藥與健康研究院研究員潘光錦博士,其2002年碩士畢業于...

  • 2016

    4-23

    關于293/293T細胞1、種屬都為人,不是鼠。2、來源:293細胞是轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系,293T細胞由293細胞派生,同時表達SV40大T抗原,含有SV40復制起始點與啟動子區的質粒可以復制。用Ca3(PO4)2轉染效率可高達50%。蛋白表達水平高,轉染后2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉染293T細胞是過表達蛋白并獲得細胞內及細胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。3、形態為上皮細胞,能致瘤。4、染色體核型:亞三倍體人細胞系。染色體眾...

  • 2016

    4-22

    一、免疫組化技術的基本原理應用免疫學及組織化學原理,對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。*,抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來,以其作為抗原或半抗原去免疫小鼠等實驗動物,制備特異性抗體,再用這種抗體(*抗體)作為抗原去免疫動物制備第二抗體,并用某種酶(常用辣根過氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結合,將抗原放大,由于抗體...

  • 2016

    4-20

    實驗原理:PCR擴增是模擬天然DNA復制過程,利用DNA聚合酶在體外(試管中)擴增一對引物之間特異性DNA片段的方法。其主要熱循環過程可分為三個步驟:(1)高溫變性(denature):提供DNA復制的有效模板。(2)低溫退火(anneal):引物與模板DNA復性,提供游離3’-OH端供DNA復制起始;(3)中溫延伸(extend):依賴Mg2+,DNA聚合酶催化合成與模板互補的新的DNA分子。以上變性、退火、延伸三個過程組成一個循環周期;常循環25~40周期,經過n輪循環后...

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