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技術(shù)文章/ Technical Articles

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  • 2016

    6-3

    分枝桿菌引起的疾病,如結(jié)核病、麻風(fēng)病和布魯利壞死病(Buruliulcers)一直是引起高致殘率和死亡率的疾病。耐藥結(jié)核菌及其與艾滋病并發(fā)對(duì)結(jié)核病的防控帶來(lái)了極大挑戰(zhàn)。多數(shù)致病性分枝桿菌生長(zhǎng)緩慢,嚴(yán)重阻礙了對(duì)該類病原菌的研究和藥物、疫苗的研發(fā)等。研究團(tuán)隊(duì)前期研究已證明自主發(fā)光的結(jié)核分枝桿菌可作為良好的報(bào)告菌株,能極大降低體外抗結(jié)核藥物篩選和體內(nèi)篩選、評(píng)價(jià)抗結(jié)核藥物和疫苗的成本,縮短時(shí)間,節(jié)約人力和減少小動(dòng)物的使用。然而,前期構(gòu)建的菌株發(fā)光元件并不是十分穩(wěn)定,而且有一個(gè)卡那霉素...

  • 2016

    5-28

    NanoLuc™螢光素酶是Promega公司推出一種新型的螢光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa,171個(gè)氨基酸),發(fā)光更亮,比任何現(xiàn)有的生物發(fā)光酶用途更加廣泛的特點(diǎn),它是目前性能的生物發(fā)光報(bào)告基因之一。NanoLuc™螢光素酶的這些屬性為報(bào)告基因檢測(cè)提供了新的功能,在需要更高靈敏度的復(fù)雜生物學(xué)應(yīng)用中深具潛力。NanoLuc技術(shù)包含一種新型底物——furimazine和一種*的酶(NanoLuc™螢光素酶),前者由Promega公司有機(jī)...

  • 2016

    5-27

    睪酮檢測(cè)試劑盒3個(gè)測(cè)試原理睪酮檢測(cè)試劑盒測(cè)試儀的使用方法:應(yīng)將ELISA測(cè)試儀安裝于溫度,濕度相對(duì)穩(wěn)定的干燥,清潔,安靜的實(shí)驗(yàn)室里,電源電壓可用交流電.使用時(shí)分校正儀器,測(cè)試樣品,清洗比色皿三個(gè)環(huán)節(jié)。睪酮檢測(cè)試劑盒基本原理:一、是免疫學(xué)反應(yīng)過(guò)程,包括抗原、抗體、酶標(biāo)記物之間的反應(yīng);二、是酶和底物反應(yīng)過(guò)程,可以使用不同的酶/底物系統(tǒng);三、是檢測(cè)方法的建立,可以利用已經(jīng)存在的各種分析手段。

  • 2016

    5-26

    與DNA凝膠電泳一樣,蛋白質(zhì)凝膠電泳也是實(shí)驗(yàn)室中稀松平常的工作。無(wú)論是Westernblot還是質(zhì)譜分析,都離不開蛋白電泳。研究人員通過(guò)大小(1D)和電荷(2D)來(lái)分辨蛋白質(zhì)。當(dāng)然,僅僅分離蛋白是不夠的,它們必須要經(jīng)過(guò)染色。染料的選擇有很多,具體選哪種,這取決于靈敏度要求、現(xiàn)有的設(shè)備和下游的應(yīng)用。常規(guī)之選研究人員主要使用三種染料來(lái)處理日常的蛋白凝膠:考馬斯藍(lán)、銀染和熒光。據(jù)Sigma-Aldrich公司蛋白技術(shù)的研發(fā)JeffreyTurner介紹,染料的選擇基本上可以歸結(jié)為“...

  • 2016

    5-25

    Westernblot一直是個(gè)很費(fèi)時(shí)間的體力活。從跑膠、轉(zhuǎn)印到抗體孵育,每一步都要配制各種緩沖液,外加花費(fèi)大量的時(shí)間。若想當(dāng)天知道結(jié)果,必須起早摸黑,忙碌一天。如今,各種新產(chǎn)品的出現(xiàn),讓我們能夠更快地獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果。這些新產(chǎn)品包括預(yù)制膠以及快速轉(zhuǎn)印儀。在這個(gè)夏天,賽默飛世爾科技又推出一款快速轉(zhuǎn)印儀PierceG2FastBlotter。傳統(tǒng)免疫印跡技術(shù)通常需要一小時(shí)甚至轉(zhuǎn)印才能保證有效的蛋白轉(zhuǎn)移。而與ThermoScientificPierce1-StepTransferBuf...

  • 2016

    5-24

    即使蛋白酶對(duì)細(xì)胞功能很重要,但你也有不想見(jiàn)到它們的時(shí)候。比如,在純化蛋白質(zhì)的時(shí)候,你可不想讓蛋白酶大肆吞噬你的目標(biāo)蛋白吧,特別是低豐度蛋白。如今,市場(chǎng)上有多種蛋白酶抑制劑可供選擇,幫助你在必要時(shí)停止蛋白酶的活性。為了對(duì)付細(xì)胞和組織樣品中存在的各種蛋白酶,抑制劑的選擇也在不斷增加。目前,主要有四種類型的蛋白酶,根據(jù)他們活性位點(diǎn)中的氨基酸命名:絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶。蛋白酶抑制劑可以特異針對(duì)一種蛋白酶,也可以是廣譜的。人們通常根據(jù)抑制劑作用的蛋白...

  • 2016

    5-22

    在轉(zhuǎn)基因和敲除研究中,維持多能性對(duì)利用小鼠胚胎干(ES)細(xì)胞至關(guān)重要。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多因子可以影響ES細(xì)胞的多能性,其中之一就表現(xiàn)在白血病抑制因子(LIF)對(duì)ES細(xì)胞培養(yǎng)的影響。關(guān)于抑瘤素M(OSM)能補(bǔ)償LIF在ES細(xì)胞培養(yǎng)中的作用,對(duì)此存在不一致的報(bào)道。一些研究提示在維持ES細(xì)胞多能性方面,OSM不如LIF有效。然而,其他研究發(fā)現(xiàn)它們是等效的。在本研究中,我們證明在維持ES細(xì)胞多能性上,人OSM擁有與小鼠LIF相類似的功效,包括長(zhǎng)期(超過(guò)10天)維持多能性、體外分化的能力、活...

  • 2016

    5-21

    海灣戰(zhàn)爭(zhēng)期間,美于保護(hù)*陸戰(zhàn)隊(duì)避免患上炭疽病的一款設(shè)備,如今被一位倫敦科學(xué)家別出心裁地應(yīng)用于預(yù)防加拿大男性患上侵襲性前列腺癌。這款設(shè)備鑒定結(jié)果度高、速度快。只需一滴血,三四分鐘后,研究人員便可判斷樣本患上的是生長(zhǎng)緩慢的典型性前列腺癌,還是必須得到積極治療的惡性前列腺癌。倫敦勞森健康研究所(LawsonHealthResearchInstitute)的科學(xué)家,HonLeong博士談到這款儀器時(shí)說(shuō),“這很可能是一款檢測(cè)前列腺癌的理想儀器。”在加拿大的薩斯喀徹溫省(Saskatch...

  • 2016

    5-19

    RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀技術(shù)又稱為RIP(RNAimmunoprecipitation),可以說(shuō)是RNA版的ChIP(染色質(zhì)免疫沉淀),該技術(shù)能幫助人們分析與RNA結(jié)合蛋白相關(guān)的核酸。在RIP試劑盒(如Sigma的Imprint®RNAImmunoprecipitationkit)的幫助下,研究者們能夠利用針對(duì)RNA結(jié)合蛋白的抗體,從細(xì)胞提取物中捕獲與蛋白相結(jié)合的RNA,再通過(guò)qPCR、芯片或二代測(cè)序技術(shù)對(duì)這些RNA進(jìn)行鑒定。不論是細(xì)胞質(zhì)還是細(xì)胞核,都會(huì)發(fā)生RNA與蛋白...

  • 2016

    5-18

    在基因組測(cè)序中,PCR擴(kuò)增似乎是繞不過(guò)去的一步。然而,PCR也帶來(lái)一些問(wèn)題,包括不均勻擴(kuò)增,導(dǎo)致某些序列的比例過(guò)高。對(duì)目前的新一代測(cè)序(NGS)平臺(tái)而言,測(cè)序某些堿基組成上存在嚴(yán)重偏向的基因組區(qū)域仍是一大挑戰(zhàn)。在GEN雜志上,PatriciaFitzpatrickDimond博士介紹了PCR-Free的基因組測(cè)序。文庫(kù)制備的變革2009年,Sanger研究院的IwankaKozarewa博士及其同事介紹了一種無(wú)需擴(kuò)增的Illumina文庫(kù)制備方法(NatureMethods2...

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